油茶转运蛋白基因ABCB26的克隆及表达分析

余姝姝, 周俊琴, 卢梦琪, 刘懿瑶, 杨进, 谭晓风*
中南林业科技大学, 经济林培育与保护教育部重点实验室, 经济林育种与栽培国家林业局重点实验室, 经济林培育与 利用湖南省2011协同创新中心, 长沙410004

通信作者:谭晓风

摘 要:

以油茶(Camellia oleifera) ‘华硕’品种为研究对象, 通过RT-PCR克隆得到腺苷三磷酸结合盒转运蛋白ABCB基因家族的一个成员, 命名为CoABCB26。该基因的开放阅读框(ORF)为1 491 bp, 共编码496个氨基酸。序列比对发现, 油茶CoABCB26基因与茶树(Camellia sinensis)的CsABCB26基因亲缘关系最近, 相似性达99%,且具有ABC转运蛋白3个特殊结构域: Walker A结构域、 ABC标签序列和Walker B结构域。 CoABCB26转运蛋白为稳定的疏水性蛋白, 相对分子质量55.88 kDa, 理论等电点为8.69, 具有2个跨膜结构域, 但不具有信号肽; 其二级结构主要由α螺旋和无规卷曲两种元件构成。实时定量PCR结果表明, CoABCB26基因在芽和花粉中的表达量较高, 且在授粉78 h时, ‘华硕’ב华金’异交组合的花柱中表达量最高, 表明CoABCB26基因在油茶后期自交 不亲和过程中发挥了重要作用。亚细胞定位发现油茶CoABCB26蛋白主要分布在细胞膜上, 可能参与物质的跨膜运输。

关键词:油茶; CoABCB26; 基因克隆; 表达; 亚细胞定位

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